蔬菜水果中氯吡脲的检测——SPE-UPLC-MS/MS法解决方案
氯吡脲是一种新型的植物生长调节剂，被广泛应用于苹果、西红柿、黄瓜、西瓜等水果和蔬菜生产，以促进果实肥大、提高产量、保鲜等。我国规定西瓜、黄瓜中氯吡脲最高残留限量为 0.1 mg/kg，猕猴桃、葡萄中氯吡脲最高残留限量为 0.05 mg/kg，而其它水果、蔬菜中氯吡脲最高残留限量尚未制定标准。
方法优势
(1) 采用乙腈提取，ProElut NH2固相萃取柱净化，UPLC-MS/MS检测;
(2) 具有前处理简单，回收率高，除杂效果明显、方法重现性好等优点;
(3) 方法定量限4.0 μg/kg。
蔬菜水果中氯吡脲的检测——SPE-UPLC-MS/MS法
1、适用范围
本方案适用于黄瓜、苹果和西红柿中氯吡脲的检测。方法定量限是4.0 μg/kg。
2、 标准品配制
(1) 氯吡脲储备液1.0 mg/mL，准确称取氯吡脲原药，用甲醇配制成1.0 mg/mL的储备液。
(2) 中间液混标0.5 μg/mL，吸取一定体积氯吡脲储备液，用甲醇配制成0.5 μg/mL的中间液。
3、提取
(1) 称取5.0 g样品，加入20 mL乙腈，振荡5 min，加入3 g NaCl，振荡5 min，6000 rpm下离心2 min;
(2) 取10 mL上清液于10 mL氮吹管中，将上清液50 ℃水浴条件下氮吹至干;
(3) 向氮吹管中加入1 mL 1%氨水，涡旋至完全溶解，加入5 mL二氯甲烷，涡旋2 min，4000 rpm离心
2 min，取下层清液待净化。
4、净化—— ProElut NH2 500 mg/6 mL(Cat.# 63305)
(1)活 化：
依次用5 mL甲醇、5 mL二氯甲烷活化;
(2)上 样：
加入待净化液，弃去流出液;
(3)淋 洗：
加入5 mL二氯甲烷，弃去流出液;
(4)洗 脱：
加入5 mL 30%甲醇二氯甲烷溶液，收集流出液;
(5)重新溶解：
将洗脱液在50 ℃下氮吹至干，用乙腈定容至1 mL，上机分析。
5、色谱条件
UPLC 条件：
色谱柱：Leapsil C18 100 × 2.1 mm 2.7 μm (Cat.# 86005)
流 速：0.3 mL/min
进样量：5 μL
柱 温：35 ℃
流动相：乙腈：0.1%甲酸水=4:6
质谱条件：
电离模式：ESI
扫描方式：正离子扫描
检测方式：多反应监测
电喷雾电压：5500 V
雾化气压力：50 psi
辅助气压力：50 psi
气帘气压力：20 psi
离子源温度：500 ℃
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表
表1 氯吡脲的定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞气能量
药物名称
定性离子对
定量离子对
碰撞气能量/eV
去簇电压/V
（m/z）
（m/z）
(母离子/子离子)
(母离子/子离子)
氯吡脲
248.0/128.9
248.0/128.9
24.57
63
248.0/154.9
19.81
248.0/94.1
21.28
6、添加回收结果
表2 蔬菜和水果中氯吡脲检测的添加回收结果
回收率（%）
添加浓度为4.0 μg/kg，加标量：0.5 μg/mL，加40 μL
黄瓜
西红柿
苹果
氯吡脲
90.70
97.16
86.10
蔬菜水果中氯吡脲的检测——SPE-UPLC-MS/MS法相关产品信息
货号
名称
规格
样品前处理
63305
ProElut NH2
500 mg/6 mL 30/pk
244358
12管防交叉污染真空SPE萃取装置
12位
4803
1,3,6 mL柱管通用连接器
15/pk
4806
考克(控制流量)
15/pk
99011
真空/正压两用泵，无油
1/pk
99013
抽滤瓶套装
(包括硅橡胶管2米, 2 L抽滤瓶及橡胶塞)
1/pk
30039
FitMax针头式过滤器 Nylon
13 mm, 0.22 μm 100/pk
30040
FitMax针头式过滤器 Nylon
13 mm, 0.45 μm 100/pk
色谱柱及保护柱
86005
Leapsil C18 UHPLC/HPLC兼容反相色谱柱
100 x 2.1 mm，2.7 μm
标准品
12-S-12010A1-1ML
氯吡脲[68157-60-8]
100 μg/mL溶于乙腈1 mL
HPLC溶剂缓冲盐离子对试剂
50102
甲醇 HPLC级
4 L
50101
乙腈 HPLC级
4 L
50117
二氯甲烷 HPLC级
4 L
50144
甲酸 HPLC级
50 mL
通用色谱产品
52401B
瓶架/蓝色
50孔
52401A
瓶架/白色
50孔
1034
样品瓶（棕色/螺纹）
2 mL, 100/pk
1035
样品瓶盖/含垫（已经组装）
100/pk
H80465
HPLC 进样针
25 μL
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